Seri dilüsyonlar nasıl yapılır

İçerik

• aşamaları
• Yöntem 1 Basit bir dilüsyon gerçekleştirin
• Yöntem 2 Son dilüsyon faktörü ve konsantrasyonunu hesaplayın

Kimyada, bir seyreltme, verilen bir çözeltinin konsantrasyonunun azaltılmasından ibarettir. Bir seri dilüsyon, dilüsyon faktörünü hızlı bir şekilde büyütmek için orijinal bir çözeltinin tekrarlanan bir dilüsyonudur. Bu dilüsyon türü, genellikle günlük seyreltilmiş konsantrasyon eğrileri içeren veya belirli ortamlardaki bakteri yoğunluğunun hesaplanmasına izin verenler gibi yüksek oranda seyreltilmiş çözeltiler ve yüksek hassasiyet gerektiren deneyler sırasında yapılır. Biyokimya, mikrobiyoloji, farmakoloji veya kimyada sıklıkla yapılırlar.

aşamaları

Yöntem 1 Basit bir dilüsyon gerçekleştirin

1. 
   

   
   Doğru seyreltme sıvısını (veya seyrelticiyi) belirleyin. Seyrelticinin seçimi çok önemlidir ve seyreltmek istediğiniz çözüme bağlıdır. Seyreltici genellikle damıtılmış sudur, ancak sistematik değildir. Böylece, bakteri veya hücreleri içeren bir çözelti ile bunun yerine bir kültür ortamı kullanılır. Seri seyreltme için, tüm seyrelticilerde aynı seyreltici kullanılır.
   • Hangi seyrelticiyi kullanacağınızdan emin değilseniz, yetkili bir kişiden yardım alın veya internette insanların benzer bir deneyim için neler yapmaları gerektiğine bakın.

2. 
   

   
   9 ml seyreltme sıvısı içeren birkaç test tüpü hazırlayın. Bu test tüpleri ardışık dilüsyonlar yapmak için kullanılacaktır. İlke basittir, başlangıç ​​çözeltisinin bir örneğini alır ve bir sonraki tüpe aktarır, daha sonra bir sonraki maddeye koymak için bu tüpün bir örneğini alırsınız, vb.
   • Dilüsyonlara başlamadan önce, daha sonra karışıklığı önlemek için test tüplerini önceden tanımlamanız önerilir.
   • Her tüpte, öncekinden 10 daha düşük bir konsantrasyona sahip olacaksınız. İlk tüp, onuncu, ikinci, yüzüncü, üçüncü, bininci, vb. Gerekenden daha fazla tüp yapılmasını önlemek için seyreltme sayısını ve gereksiz yere atık seyrelticiyi önceden belirleyin.

3. 
   

   
   
   
   Ana çözeltinizle bir test tüpü hazırlayın. En az 2 ml koyun. Seri seyreltme için minimum stok çözeltisi bir mililitredir. İkinci bir dilüsyon için 2 ml bekleyin. Bu anne çözümü tüpünü bir "SM" olarak işaretleyebilirsiniz.
   • Seri seyreltmeye başlamadan önce, başlangıç ​​çözeltisini iyice karıştırın.

4. 
   

   
   İlk seyreltmeyi yapın. "SM" etiketli test tüpüne 1 ml stok solüsyonu pipetleyin ve bu miktarı etiketli test tüpüne aktarın. 1/10 9 ml dilüsyon sıvısı içerir. Homojen bir çözelti elde etmek için karıştırın. Bu tüpte, artık 10 ml çözelti vardır: 1 ml stok çözelti ve 9 ml dilüsyon sıvısı. Bu yeni çözüm öncekinden on kat daha az konsantre.

5. 
   

   
   
   
   İkinci seyreltmeyi gerçekleştirin. İkinci seri seyreltmede, etiketli tüp çözeltisinden 1 ml çıkarsınız. 1/10 ve onu tüpe dökeceksin 1/100 9 ml dilüsyon sıvısı içerir. Tüp 1/10 örneklemeden önce iyi karıştırılmış olacak. Transfer tamamlandığında, tüpü iyice karıştırın 1/100. İşaretli tüpten gelen çözüm 1/10 etiketli tüpten 10 kat daha konsantredir 1/100.

6. 
   

   
   Gerekirse bu manipülasyonu tekrarlayın. Bu prosedür, istenen dilüsyon sağlanana kadar istenen sayıda tekrar edilebilir. Konsantrasyon eğrileri içeren bir deney için, birim, onuncu (1/10), yüzüncü (1/100) veya binde (1/1000) seyreltmeler içeren bir dizi çözelti elde edebilirsiniz.

Yöntem 2 Son dilüsyon faktörü ve konsantrasyonunu hesaplayın

1. 
   

   
   Hesaplayın oran Seri seyreltmeden sonra son dilüsyon. Toplam seyreltme oranı, dilüsyon faktörünü, dilüsyonlar olduğu kadar kendisiyle çarparak elde edilir. Matematiksel olarak formül aşağıdaki gibidir: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_nile D_t toplam dilüsyon faktörünü ve D_nseyreltme oranı.
   • Öyleyse, art arda 4 kez 1/10 oranında sıvı seyreltme yaptığınızı varsayalım. Formülde, dilüsyon faktörünü şu değerle değiştirin: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
   • Seri dilüsyonunuzdaki dördüncü tüpün son dilüsyon faktörü 1/10 000'dir. Son tüpün çözeltisinin konsantrasyonu şimdi orijinal çözeltiden 10 000 kat daha düşüktür.

2. 
   

   
   Dilüsyondan sonra bir çözeltinin konsantrasyonunu belirleyin. Seri seyreltmeden sonra bir çözeltinin son konsantrasyonunu bulmak için başlangıç ​​konsantrasyonunu bilmeniz gerekir. Formül o zaman: C_nihai = C_ilk/ Aile C_nihai seyreltilmiş çözeltinin terminal konsantrasyonunu temsil eden, C_ilkstok çözeltisinin konsantrasyonu ve Dseyreltme oranı önceden belirlenmiştir.
   • Öyleyse, ml başına 1.000.000 hücre konsantrasyonuna sahip bir hücre çözeltisini seyreltirseniz ve seyreltme oranınız 1.000 olarak ayarlandıysa, seyreltilmiş numunenizin son konsantrasyonu ne olur?
   • Formülü kullanın:
     • C_nihai = C_ilk/ A
     • C_nihai = 1 000 000/1 000
     • C_nihai = 1000 hücre / ml

3. 
   

   
   Kullanılan birimlere dikkat edin. Hesaplamalarınızı yaparken daima aynı birimleri kullanıp kullanmadığınızı kontrol edin. Böylece, ml başına hücre konsantrasyonundan başlarsanız, nihai sonucunuz ml başına hücrelerde olacaktır. Başlangıç ​​konsantrasyonunuz milyon başına parça (ppm) ise, nihai konsantrasyonunuz milyon başına parça olacaktır.